Test di citotossicità

Che cos'è il test di citotossicità nei dispositivi medici?

I test di citotossicità dei dispositivi medici vengono utilizzati da un fabbricante per valutare l'impatto dei materiali nei suoi prodotti al fine di garantire che nessuna sostanza tossica inibisca la crescita cellulare o ne causi la morte. Durante la fabbricazione di un dispositivo medico, molti materiali possono essere tossici per le cellule, con conseguente rischio per la sicurezza del paziente. Inoltre, dopo la sterilizzazione con radiazioni è possibile che nella composizione dei materiali si verifichino dei cambiamenti, che possono influire sulla tossicità di tali materiali. I metodi di sterilizzazione a gas possono lasciare residui sul dispositivo, con conseguente rilascio di sostanze ed effetti dannosi sulle cellule viventi.

Come vengono eseguiti i test di citotossicità?

Molti test di biocompatibilità vengono eseguiti sugli animali (in vivo), tuttavia i test di citotossicità vengono eseguiti all'esterno di un organismo vivente, ad esempio all'interno di una provetta o di una piastra di coltura (in vitro). I test di citotossicità vengono eseguiti esponendo cellule di mammifero direttamente al dispositivo o a un estratto del dispositivo e valutando l'impatto sulle cellule.

Quali metodi vengono utilizzati per i test di citotossicità?

Esistono molti metodi di test consolidati per la valutazione della citotossicità. I fabbricanti devono considerare il metodo utilizzato per esporre la linea cellulare a materiali tossici o rilasciabili che potrebbero essere presenti nel dispositivo.

Metodi di estrazione (qualitativi e quantitativi):

• Dispositivi solidi estratti in soluzione: i dispositivi solidi vengono estratti in soluzione e l'estratto liquido viene quindi applicato alle cellule e ne vengono osservati gli effetti. Un vantaggio di questo metodo consiste nella possibilità di testare diverse diluizioni dell'estratto del campione. Questo può fornire informazioni sulla concentrazione richiesta per generare un risultato citotossico.

Metodi di contatto diretto (qualitativi e quantitativi):

• I campioni liquidi vengono aggiunti direttamente alle cellule.

• I campioni solidi vengono posizionati direttamente su uno strato di cellule.

Metodi di contatto indiretto (solo valutazione qualitativa):

• Diffusione su agar: la linea cellulare stabilita viene sospesa all'interno di una soluzione di agar. Una volta solidificati, i campioni vengono posizionati sull'agar. I liquidi rilasciabili dal dispositivo si diffondono attraverso l'agar e le cellule vengono esaminate per determinare se vi sia un effetto citotossico. Questo metodo potrebbe non essere appropriato per tutti i dispositivi poiché è in grado di rilevare effetti citotossici solo per sostanze rilasciabili in grado di diffondersi attraverso lo strato di agar.

• Diffusione del filtro: la linea cellulare viene stabilita sopra un filtro con pori da 0,45 μm. I filtri vengono trasferiti sulla superficie di uno strato di agar e i campioni vengono applicati sul filtro. Dopo l'esposizione al campione, le cellule vengono esaminate per verificare la presenza di effetti citotossici.

In STERIS siamo specializzati nel metodo di assorbimento del rosso neutro (NRU). Il NRU è un metodo di estrazione quantitativo che rimuove le distorsioni dei tecnici che si riscontrano in metodi qualitativi come il test di eluizione MEM.

Quali sono i vantaggi dei test di citotossicità per i dispositivi medici?

I test di citotossicità sono richiesti per la presentazione ad enti regolatori come la Food and Drug Administration (FDA) e il Regolamento europeo sui dispositivi medici (MDR) per l'approvazione della maggior parte dei dispositivi medici.

La citotossicità è uno dei test principali completati durante una valutazione di biocompatibilità e spesso il test iniziale eseguito durante la valutazione del prodotto.

I test di citotossicità possono essere utilizzati per valutare il tipo di materiale o le modifiche del fornitore per l'impatto sulla biocompatibilità. Questo test può essere utilizzato in assenza di ripetizione di altri test di biocompatibilità.

I dati storici sui materiali sono sufficienti per molti test di biocompatibilità, tuttavia è necessario un test diretto sul dispositivo stesso per la valutazione della citotossicità.

Che cos'è lo standard di test ISO 10993 in relazione alla citotossicità?

La norma ISO 10993 guida i fabbricanti di dispositivi medici e i laboratori di prova nella valutazione della biocompatibilità dei dispositivi medici. Questa serie di standard descrive i requisiti generali per la valutazione biologica dei dispositivi medici attraverso la valutazione del rischio oltre a fornire istruzioni sull'esecuzione di ciascun test di biocompatibilità. I test di citotossicità vengono condotti secondo la norma ISO 10993-5: Valutazione biologica dei dispositivi medici - Test di citotossicità in vitro.

Accreditamento STERIS

Il laboratorio di STERIS a Brooklyn Park, Minnesota, offre test di citotossicità accreditati ISO/IEC 17025 con la possibilità di condurre i test come studio di laboratorio non clinico secondo i requisiti della norma FDA 21 CFR Parte 58 per le buone pratiche di laboratorio (GLP).